激光共聚焦顯微鏡采用激光作為光源,在傳統光學顯微鏡基礎上采用共軛聚焦原理和裝置,并利用計算機對所觀察的對象進行數字圖象處理的一套觀察、分析和輸出系統。
共聚焦顯微技術的關鍵點在于,每次只對空間上的一個點(焦點)進行成像,再通過計算機控制的一點一點的掃描形成標本的二維或者三維圖象。激光共聚焦顯微鏡的功能包括光譜掃描及拆分功能可去除自發光及熒光串色干擾。
共定位分析功能,可定量分析不同標記之間的定位關系,并顯示其熒光分布圖,可分別提取單標記和共定位圖像;三維重建功能;可再次調用存儲在每張圖像里所有的拍照參數來重新實驗及進行準確對比。
激光共聚焦顯微鏡注意事項:
1、PSU、559激光器、氬離子激光器是雙開關,開機時應先打開電源開關,后旋轉鑰匙開關,其中559激光器需等到“TEMP”指示燈不再閃爍后方可旋轉鑰匙開關;同時405、635激光控制器必開,氬離子激光器和559半導體激光器選擇性開。
2、物鏡選擇:x10、x20、x40物鏡為干鏡,鏡樣間介質為空氣;x30、x60、x100為油鏡,x30鏡樣間介質硅油(適合厚標本),x60和x100鏡樣間介質為普通鏡油。
3、使用時低倍物鏡下聚焦,高倍下再滴油,使用油鏡測試后要用長纖維擦鏡紙將鏡油擦除,若污漬不易除去(油漬),應使用長纖維擦鏡紙配和C?H?O進行擦除。
4、測量生物樣品時激光強度不要超過12%,強度高容易發生光漂白。
5、關閉軟件后需等激光共聚焦顯微鏡復位后方可繼續操作,長壽命光源控制器先關閉控制開關,待300s完成后再關閉電源開關;PSU、559激光器、氬離子激光器先關閉鑰匙開關,后關閉電源開關。